Molekulyar çəki nə qədər böyükdürsə, bobin bir o qədər uzun olur və molekul bir o qədər yavaş gedir. Beləliklə, elektroforez + SDS doğma yükə görə deyil, molekulyar çəkiyə görə ayrılır. Vacib qeyd: Eyni uzunluqdakı zülallar adətən gel elektroforezi + SDS ilə ayrıla bilməz.
Eyni molekulyar ağırlığa malik zülalları necə ayırırsınız?
Sentrifuqasiya, elektroforez və xromatoqrafiya zülalların təmizlənməsi və təhlili üçün ən çox yayılmış üsullardır. Santrifüqalama zülalları onların kütləsi və formasından təsirlənən çökmə sürətinə əsasən ayırır.
Zülalları yükə görə ayıran hansı üsullar?
Zülalları xalis yüklərinə əsasən ion mübadiləsi xromatoqrafiyası ilə ayırmaq olar. Əgər zülalın pH 7-də xalis müsbət yükü varsa, o, adətən tərkibində karboksilat qrupları olan muncuq sütununa bağlanacaq, mənfi yüklü zülal isə bağlanmayacaq (Şəkil 4.4).
Aşağıdakı üsullardan hansı zülalları molekulyar çəkiyə görə ayırmaq üçün ən uyğundur?
Bölünməyə əsaslanan xromatoqrafiya üsulları amin turşuları, karbohidratlar və yağ turşuları kimi kiçik molekulların ayrılması və müəyyən edilməsində çox effektivdir. Bununla belə, yaxşılıq xromatoqrafiyaları (məs. ion mübadiləsi xromatoqrafiyası) nuklein turşuları və zülallar kimi makromolekulların ayrılmasında daha effektivdir.
Hansı sütun növüxromatoqrafiya zülalları molekulyar çəkiyə görə ayırır?
Gel filtrasiyası (GF) xromatoqrafiyası zülalları yalnız molekulyar ölçü əsasında ayırır. Ayırma, molekulların sterik səbəblərə görə fərqli dərəcələrə malik olduğu məsaməli matrisdən istifadə etməklə əldə edilir - məsələn, daha kiçik molekulların daha çox çıxışı var və daha böyük molekullar matrisdən xaric edilir.
