Gəmini otaq istiliyində 2-3 dəqiqə inkubasiya edin. Möhkəm yapışan hüceyrələr 37 °C-də tez ayrıla bilər. Hüceyrələri mikroskop altında müşahidə edin. Ayrılan hüceyrələr mikroskop altında yuvarlaqlaşdırılmış və refraksiyaya davamlı görünür.
Hüceyrələri çox uzun müddət Tripsizləşdirsəniz nə olar?
Tripsin konsentrasiyası çox yüksək olan hüceyrələrin çox uzun müddət ərzində inkubasiyası hüceyrə membranlarına zərər verəcək və hüceyrələri öldürəcək. İstifadə olunacaq tripsinin konsentrasiyasına əmin deyilsinizsə, aşağı konsentrasiyadan istifadə edin.
Hüceyrələri necə Tripsizləşdirirsiniz?
Hüceyrələri topaqları parçalamaq üçün hüceyrə süspansiyonunu zərif pipetləmə yolu ilə yenidən dayandırmaq olar. Lazım gələrsə, hüceyrə sayımı və/və ya subkulturasiya üçün əlavə seyreltmə edilə bilər.
Hüceyrələrin birləşdirilməsi nə qədər vaxt alır?
ilk xanalar artıq 3-5 dəq sonra əlavə olunur! Təcrübəmə görə, EC-lərin əksəriyyəti 10-20 dəqiqədən sonra bağlandı. Ancaq nə qədər gözləsəniz, qoşma bir o qədər möhkəm olar.
Hüceyrələri iki gün ardıcıl olaraq Tripsizləşdirmək pisdir?
Bəli, 24 saat bölündükdən sonra hüceyrələrinizi davamlı olaraq tripsinize edirsinizsə, bu zərərlidir. Parçalanmanı 48 saatlıq parçalanmadan sonra etmək məsləhətdir. … Morfologiya yaxşı olana qədər hüceyrələri saxlaya bilərsiniz (Bu, hüceyrə tipinizdən asılıdır, bəzi hüceyrələr 80 keçidə, bəziləri isə 10-a qədər keçə bilər).
