2024 Müəllif: Elizabeth Oswald | [email protected]. Son dəyişdirildi: 2024-01-13 00:03
Həmçinin nümunənizi əvvəlki həcmin onda 1 hissəsinə qədər ultrasüzgəcdən keçirərək duzsuzlaşdıra bilərsiniz, bu da yenidən durulaşdırılıb UF addımını təkrarlayın. Duzsuzlaşdırma üçün ən yaxşı üsul ultrasüzgəcdən (klassik, mərkəzdənqaçma deyil) 50 mM bufer qarşı gel filtrasiyası iləduzsuzlaşdırmadır.
Zülalların təmizlənməsində duzsuzlaşdırma nədir?
Duzsuzlaşdırma protein məhlullarındanduzları, nuklein turşularından fenol və ya korporasiya olunmamış nukleotidləri və ya birləşdirilmiş zülallardan artıq çarpaz əlaqə və ya etiketləmə reagentlərini çıxarmaq üçün istifadə olunur.
Zülalları necə təmizləyirsiniz?
Toplu zülalların təmizlənməsində zülalları təcrid etmək üçün ümumi ilk addım ammonium sulfatla çökmə (NH4) 2SO4. Bu, artan miqdarda ammonium sulfat əlavə etməklə və çökmüş zülalın müxtəlif fraksiyalarını toplamaqla həyata keçirilir. Sonradan ammonium sulfat dializ vasitəsilə çıxarıla bilər.
Mübadilə zülallarını necə bufer edirsiniz?
Bufer mübadiləsi ilk olaraq nümunənin daxil olması lazım olan buferlə sütun qatranı ilə tarazlaşdırılmaqla həyata keçirilir. Hər iki halda nümunəni içəriyə daşıyan tampon tərkib hissələri sütun, sütunun əvvəlcədən tarazlaşdırıldığı məhlulla əvəz olunacaq.
Aşağıdakı xromatoqrafiya texnikasından hansı zülalların duzsuzlaşdırılması üçün tətbiq oluna bilər?
Yuxarıda qeyd edildiyi kimi, gel filtrasiyası zülal üçün effektiv şəkildə istifadə edilə bilər.duzsuzlaşdırma və əvvəlcə gel filtrasiya sütununun su ilə balanslaşdırılması ilə həyata keçirilir. Bununla belə, bufer mübadiləsi əvvəlcə sütun qatranını hədəf tamponla tarazlaşdırmaqla həyata keçirilir.
Tövsiyə:
Bakteriyalar zülalları qlikosilləşdirirmi?
Bakteriyalarda protein qlikosilasiyası patogenlərlə məhdudlaşmır həm də müəyyən Bacteroides növləri kimi komensal orqanizmlərdə mövcuddur və həm N-əlaqəli, həm də O-əlaqəli qlikozilləşmə yolları çoxsaylı zülalları dəyişdirin. Zülalların qlikosilləşməsini kim edir?
Turşular zülalları denatürasiya edəcəkmi?
Zülallar qələvi və ya turşu, oksidləşdirici və ya reduksiya edən maddələr və müəyyən üzvi həlledicilərlə müalicə olunmaqla denatürasiya edilir. Denaturasiya edənlər arasında ilkin quruluşa təsir etmədən ikinci və üçüncü quruluşa təsir edənlər maraqlıdır.
Yuyucu vasitələr niyə zülalları denatürasiya edir?
Yuyucu vasitənin xassələrinə konsentrasiya, temperatur, tampon pH və ion gücü və müxtəlif əlavələrin mövcudluğu kimi təcrübə şərtləri təsir edir. … Bu yuyucu vasitələr membranları tamamilə pozur və protein-zülal qarşılıqlı əlaqəsini pozaraq zülalları denatürasiya edir.
Zülalları həddindən artıq ifadə etmək nə üçün faydalıdır?
Zülalların çoxu isə çox az miqdarda olur və ya zülalları asanlıqla təmizlənə bilməyən orqanizmlərdə olur. Zülalın həddindən artıq ifadəsi Zülalın həddindən artıq ekspressiyası Zülal istehsalı xüsusi bir zülalın yaradılmasının biotexnoloji prosesidir.
Proteazlar zülalları necə parçalayır?
Proteaza (həmçinin peptidaza və ya proteinaza adlanır) proteolizi, zülalların daha kiçik polipeptidlərə və ya tək amin turşularına parçalanmasını kataliz edən (reaksiya sürətini artıran və ya "sürətləndirən") fermentdir. Onlar bunu proteinlərdəki peptid bağlarını hidroliz yolu iləayıraraq, suyun bağları qırdığı reaksiya ilə edirlər.
