Keçən illərdə Coriell yeni doğulmuş dana zərdabında olan tamamlayıcı zülalını təsirsiz hala gətirmək üçün hüceyrə mədəniyyətləri üçün bütün istiliklə təsirsizləşdirilmiş serumdan istifadə etmişdir. Dölün iribuynuzlu zərdabına dəyişdiyimizə görə, əksər hüceyrə xətləri üçün istilik inaktivasiyası lazım deyil olduğunu görürük.
İnaktiv olmayan FBS-ni nə qədər qızdırırsınız?
Dölün iribuynuzlu serumunun (FBS) istiliklə inaktivasiyası üçün aşağıdakı protokol təklif olunur. FBS qarışdırıcı su banyosunda 30±2 dəqiqə ərzində 56± 2°C-ə qədər qızdırılır. İstilik inaktivasiyası (HI) – FBS-nin 56±2° temperaturda 30±2 dəqiqə saxlanıldığı proses.
İstifadə etməzdən əvvəl FBS üçün istilik inaktivasiyası nə üçün lazımdır?
FBS-nin ümumi müalicəsi istiliklə inaktivasiyadır, burada FBS arabir silkələnmə ilə su hamamında 56°C-də 30 dəqiqə qızdırılır. Məqsəd FBS [24]-də mövcud olan komplement sisteminin hər hansı komponentlərini və hüceyrə böyüməsinin digər potensial naməlum inhibitorlarını qeyri-aktiv etməkdir.
İnaktivləşdirilmiş serumu niyə qızdırmaq lazımdır?
İstilik inaktivasiyasının məqsədi məhsulun böyüməni təşviq edən xüsusiyyətlərinə təsir etmədən serumdakı komplement fəaliyyətini məhv etməkdir. Serumdan komplement fəaliyyətinin çıxarılması əksər hüceyrə mədəniyyətləri üçün tələb olunmur, lakin komplement fəaliyyətinə həssas olan kulturalar üçün lazım ola bilər.
İstiliksiz FBS-ni necə saxlayırsınız?
Ərimiş FBS və digər seraları təhlükəsiz soyuducu vəsaxlama. Ərimiş serumu dərhal istifadə edin. Maye FBS və digər serumlar soyuducuda (2 ilə 8 °C arasında) saxlanıla bilər dörd həftəyə qədər.